Rezolvarea subunităților trombinei precum enzima Agapurin din veninul Agkistrodon halys și secvențierea reziduurilor de aminoacizi

[Rezumat] Obiectiv Determinarea reziduurilor de 15 aminoacizi N-terminale a două subunități similare ale Agacutinei.Cele două subunități ale moleculei de enzimă trebuie divizate pentru a obține lanțul peptidic unic al subunității și secvențiate.Metode Agacutina foarte purificată a fost obținută prin metoda biochimică.Probele de subunități individuale pentru identificare și secvențiere au fost preparate prin separare prin electroforeză SDS-PAGE, recuperarea benzilor adezive subunității și tehnologia de electrotransfer cu membrană PVDF.Acesta din urmă a determinat 15 reziduuri de aminoacizi la N-terminalul subunității prin metoda de degradare Edman.Rezultate Secvența subunității mari (16 kDa) a fost DCSSGWSSYEEHQYY, iar cea a subunității mici (15 kDa) a fost DSSGWSSYEEGHEYYV.Concluzie Rezultatele de secvențiere au arătat că Agacutin a fost o nouă enzimă asemănătoare cu trombina de venin de șarpe prin căutarea în baza de date NCBI.